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规范使用BP003 Western Blot专用吸水纸的步骤分享

更新时间:2026-11-04      浏览次数:5
  Western Blot 转膜实验中,滤纸尺寸偏差、浸泡不充分容易产生气泡,造成蛋白转印不均、条带缺失。BP003 Western Blot 专用吸水纸采用高纯棉浆纤维素制成,无外源杂质干扰蛋白信号,多用于半干转、湿转体系的转印支撑与吸液操作,规范使用 BP003 Western Blot 专用吸水纸,能够减少背景杂带,提升转膜重复性。
 

 

  1、裁切与前期检查
 
  根据凝胶和转印膜尺寸裁切 BP003 吸水纸,吸水纸长宽与凝胶保持一致,不得大于或小于胶面,避免边缘短路、局部转印异常;拿取时仅触碰边角区域,禁止徒手接触纸面中间区域,防止手上油脂、蛋白污染纸面,检查纸面有无破损、纸屑、杂质,不合格的吸水纸直接弃用。
 
  2、缓冲液浸泡操作
 
  将裁切好的 BP003 吸水纸浸没在对应转印缓冲液中,浸泡时间不少于 30 秒,让滤纸充分浸润,保证毛细吸水性能均匀;浸泡完成后轻轻提起,自然沥去多余缓冲液,不要用力挤压揉搓,防止滤纸纤维结构破坏,影响液体传导效果。
 
  3、转膜夹层组装使用
 
  湿转、半干转组装夹层时,按照顺序铺设吸水纸,每层铺设完成后使用玻璃滚棒平稳擀压,排净吸水纸与凝胶、膜之间的气泡,气泡位置会阻断蛋白迁移形成空白条带;多层叠加时保证每层对齐,严禁吸水纸跨层搭接,防止阴阳极导通短路,半干转模式下阳极、阴极侧吸水纸层数按照仪器说明书搭配。
 
  4、膜表面吸液辅助使用
 
  封闭、洗涤、ECL 显色步骤后,可使用 BP003 吸水纸轻贴膜的边角位置吸除多余液体,只吸侧边残留液体,严禁吸水纸直接按压、擦拭膜上蛋白结合区域,避免蛋白被吸附脱落,降低目标条带信号强度。
 
  5、实验后处置与存放
 
  BP003 吸水纸为一次性耗材,单次实验结束后直接丢弃,不可重复回收使用;未裁切的整包吸水纸密封存放于干燥无尘环境,远离酸碱、蛋白试剂以及荧光污染物,防止提前污染,开封后尽快用完。

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